这项工作的开展是为了研究高脂血症反映了患者动脉粥样硬化疾病的表现和进展所继发的脂代谢异常的发病。除了饮食，利用药用植物作为一种药理学方式来防止脂质代谢的改变已经受到了一些研究的广泛关注。在本研究中，我们研究了100 μg/ml的迷迭香固定油提取液对脂质参数的影响，并利用其对高脂血症的保护作用进行了2周的研究。结果表明，100 μg/ ml的迷迭香固定油提取液对上述各指标均有明显的保护作用。

高脂血症，迷迭香，脂质谱，肝酶，组织病理学研究。

这项工作的开展是为了研究高脂血症反映了患者动脉粥样硬化疾病的表现和进展所继发的脂代谢异常的发病。除了饮食，利用药用植物作为一种药理学方式来防止脂质代谢的改变已经受到了一些研究的广泛关注。在本研究中，我们研究了100 μg/ml的迷迭香固定油提取液对脂质参数的影响，并利用其对高脂血症的保护作用进行了2周的研究。结果表明，100 μg/ ml的迷迭香固定油提取液对上述各指标均有明显的保护作用。

高脂血症，迷迭香，脂质谱，肝酶，组织病理学研究。

影响人类的许多慢性疾病都有不均匀的地理分布。虽然一般性看法，几种疾病，特别是各种类型的癌症，肾病和肝脏疾病以及冠心病（CHD）通常由暴露于污染物和有毒环境，如化学品，杀虫剂，杀菌剂和食品添加剂。CHD的高发病率通常与高脂肪，高胆固醇和低纤维饮食以及油炸食品的消耗相关[1]。当其消费量不稳定增加时，胆固醇呈现出良好的健康危害。高胆固醇血症动脉症是冠状动脉或脑血管患者是中年和老年人死亡的最大工具。摄入脂肪饮食，缺乏运动，吸烟习惯和精神压力参与高胆固醇血症和所得动脉病变。动脉粥样硬化，一种慢性炎症疾病，其特征在于血浆脂蛋白的积累，所述血浆脂蛋白在动脉中携带胆固醇和甘油三酯，动脉粥样硬化导致冠心病（CHD），其在全球发病率和死亡率的主要原因之一[2]。虽然研究到目前为止的研究焦点主要是高脂血症的血管作用，即动脉硬化，现在仍然很明显，除了动脉粥样硬化的发展外，高脂血症对心肌的直接影响。高脂血症通常与脉管系统和心肌中的氧化/亚硝基胁迫相关联。我们之前已经显示出胆固醇毒素饮食中的大鼠心肌中过氧硝酸盐的形成，毒性反应产物的形成，胆固醇的饮食中的高脂质血症[3]。 Strong evidences have been put forward by various investigators for the involvement of free radicals production and lipid peroxidation in the onset of atherosclerosis [4]. One of the initial events in the development of atherosclerosis is the accumulation of cells contained excess lipids within the arterial wall. Hypercholesterolemia, especially elevated level of serum cholesterol and low-density lipoprotein (LDL), furthermore, oxidative stress is also suggested as a mechanism underlying hypercholesterolemia, which is an important factor in atherosclerosis. According to the oxidative modification hypothesis, oxidation of LDL is crucial to the cellular uptake of LDL in the first stages of atherosclerotic development [5]. Large acute doses of chronic exposure to toxic agents can overpower to the antioxidant defense system which cause hepatic cell damage. Natural or synthetic compounds having antioxidant properties can scavenge the free radicals which damage lipid, protein, DNA molecules and cell membrane. Their removals prevent the development of certain diseases [6]. Antioxidants had important role in decreasing serum lipids and retarding atherosclerosis. The observational epidemiological studies have suggested that individuals with high dietary antioxidant intake have lower risks of CHD which remains the leading cause of death in most countries [7]. Diet rich in fruits and vegetables are associated with decreased risk of CHD. Biochemical functions of naturally occurring antioxidants in biological systems such as flavonoids, polyphenols, vitamin C and E have been reported to protect the body system against reactive oxygen species. Antioxidant compounds, various efforts are now concentrated on many herbal plant extracts because of their potential to induce antioxidant effects [8]. Plant products are widely used in testing because of their low toxicity and great medicinal value. Much of research has concentrated on different plant extracts’ abilities to induce antioxidant effects [9]. Rosemary essential oil is used as brain and nerve tonic, and as a remedy for mental fatigue [10] as well as antiseptic, diuretic and anti- depressant; it is also used to treat cold, influenza and rheumatic pain [11] and can enhance the performance of memory [12]. Diversity in the chemical contents of rosemary as polyphenolic compounds have been ascribed to many factors, involving the environment [13], abiotic stress [14], genetic heritance [15,16] and the phenological stages of the plants [17]. The aim of this study was to extract the fixed oil of Rosmarinus officinalis grow in Al-Jabal Al Akhdar, also to investigate the protective effect of the test herbs against hyperlipidemia in experiment animals.

植物材料：Rosmarinus Officinalis L的叶子从2017年利比亚的Al-Jabal Al Akhdar地区收集。

化学成分:从Sigma和Merck公司提供1,1-二苯基吡啶基酰基（DPPH）。抗坏血酸，氯化物，铁氰化物，磷酸二磷酸二磷酸二氢膦，二元磷酸二氯酸，三氯乙酸，碳酸钠，石油醚，无水硫酸钠和吡替金属，从化学厅 - 班卓大学的生物化学实验室获得。

实验动物:在本研究中使用的25至35gm的雄性白化小鼠在班卓大学的生物化学实验室，在温度（22±3c°）的标准条件下，具有深色光循环。将动物用标准饮食和水广告喂养。

固定油提取:固定油来自干粉叶迷迭香属officinalis（100g）用光石油醚（40-60℃）在索氏甲醚（40-60℃）中萃取约4h，通过旋转真空蒸发器除去溶剂。将油样在暗气密容器中储存在7℃。

LD的确定_50.：以80只雄性白化小鼠为实验对象，测定迷迭香固定油的致死剂量。每次实验用40只小鼠，分为5组，分别给予“10、50、100、150、200μg/ml”不同剂量的精油口服。对动物进行24小时死亡率监测。在特定剂量下存活的动物数量(S)和在该剂量下死亡的动物数量(D)被确定为[18]。(表1)

每个剂量组计算死亡率，如下所示：

％死亡率= D /（S + D）x 100

根据[19]方程计算半数致死剂量。

LD_50.=最大剂量- Σ a×b/ n

a:连续两期剂量的差异。

B：连续两个术语的平均死亡动物数。

n：每组的动物数量。

实验结果如下:

固定油对高脂血症的预防作用：为研究油对高脂血症的保护作用，使用了45只小鼠，实验持续了2周。将动物随机分成三组（每次15只小鼠），如下：

组1:小鼠喂食标准合成饲料(S.d)，作为阴性对照组(-ve)。

第2组：小鼠每日给予高脂血症饲料(H.L.D)，作为阳性对照组(+ve)。

第3组：小鼠每日口服固定油100 μg/ml(加入H.L.D)。

血液抽样：在治疗前收集血样，然后在2周后收集。根据[20]通过微藻区血管描述的方法从复古轨道静脉中收集血液样品进入眼球下方眼部插座的角落。小心地分离血清和等离子体样品并储存冷冻，直至在不同的生化分析中使用。

生物化学分析：测定以下参数;血清总胆固醇[21]，HDL-胆固醇[22]，甘油三酯[23]，血液尿素[24]转氨酶（ALT＆AST）[25]，碱性磷酸酶（ALP）[26]，总蛋白质（TP）[27]，γ-戊二酰转移酶（GGT）[28]，超氧化物歧化酶（SOD）[29]，丙二醛（MDA）[30]，谷胱甘肽还原酶（GR）[31]，谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）1967]和过氧化氢酶（猫）[32]。所有生化检查都在Benghazi Medical Center进行。获得的结果在统计学上分析[33]。

与正常对照组相比，诱导高脂血症小鼠(阳性组)血脂指标均明显升高。TC、T- chol/HDL-chol、LDL、VLDL和TG浓度分别显著升高(121.6%、270.5%、573%、28.98%、28.98%)，hdl -胆固醇水平降低(40.5%)。与阳性组比较，固定油组血清脂质水平显著降低。100μg/ml固定油处理2周后，TC、T-chol/ HDL-chol、LDL、VLDL和TG分别显著降低(16.9%、2.9%、21.7%、36.7%和36.7%)，HDL-chol浓度分别升高(18%)。高脂血症小鼠肝功能检测血清丙氨酸转氨酶(37.2%)、天冬氨酸转氨酶(23.5%)、g -谷氨酰基转移酶(136.5%)、碱性磷酸酶(66%)较正常对照组轻度至中度升高，血清TP明显降低(5.75%)。顺序改变血清ALT, AST, G-GT,高山和TP总结数据(15、16、17、18和19),但是在G3,摄取100μg / ml的固定油对高脂血症的饮食两周,血清ALT, AST, G-GT ALP和降低(16.1%、8.11%、22.4%和21.6%)分别血清TP与阳性组比较，差异无统计学意义。阳性对照组血尿素均值与阳性对照组比较无显著性差异。超氧化物歧化酶(SOD)、GR、GPX和过氧化氢酶(Catalase)平均值在高脂血症组分别显著降低(26.9%、41.6%、31.6%和31.3%)。与正常组比较，高脂血症组小鼠血浆MDA水平显著升高(147.7%)，而固定油组小鼠血浆MDA水平显著降低(27.5%)。 (Table 2-4)

从体外研究或不同动物模型获得的大量科学数据支持了动脉粥样硬化氧化假说的有效性，该假说认为脂蛋白的氧化修饰是动脉粥样硬化斑块进化的关键事件。这一假设的一个推论是，抗氧化酶因此应该防止LDL氧化，并防止动脉粥样硬化[34]的发展。几项流行病学研究得出的结论是，大量摄入富含天然抗氧化剂的食物可以增强身体的抗氧化能力，降低多种疾病的风险。草药疗法或食品补充剂已日益成为预防或治疗高脂血症的有吸引力的替代方法，特别是对那些胆固醇处于[35]临界水平的人。抗氧化植物化学物质通过清除活性氧和氮素以及调节多种防御系统在人类健康中发挥着重要作用[36-37]发现，丁香清除自由基的活性最高，其次是所有香料和肉桂。酚类化合物和黄酮类化合物是一类次级代谢产物，具有广泛的生物学特性，如:抗氧化，抗动脉粥样硬化，心血管保护和改善内皮功能，研究表明酚类化合物的抗氧化活性主要是由于其氧化还原特性，使其作为还原剂，氢供体通过吸附和中和活性自由基和螯合催化脂质过氧化的铁离子发挥重要作用，被认为是治疗自由基相关疾病的有前途的药物。气相色谱-质谱联用技术得到的主要成分为1,8-桉叶脑、α-蒎烯、樟脑、莰烯、冰片。根据[38]，1,8-桉树脑具有抗菌、抗真菌、抗炎和抗氧化活性，因此在固定油中具有高浓度的1,8-桉树脑具有潜在的药用价值。

提取油的降血脂作用迷迭香属officinalis可能是由于它能够通过淬灭体内因HFD产生的自由基来对抗氧化应激。HDL-chol水平显著升高，同时血清胆固醇水平降低，明确表明抗氧化化合物如1,8-桉树脑、α-蒎烯、樟脑、莰烯、冰片等在油中发现的有益作用。高密度脂蛋白胆固醇浓度的增加也表明，固定油脂可以预防由高脂血症引起的心血管疾病。Nyangono等人[35]认为，高密度脂蛋白胆固醇的增加可能是由于从肝外组织中动员胆固醇分解并刺激胆固醇7-α-羟化酶，将胆固醇转化为胆胆酸，这是胆固醇降解的重要途径。早期的研究表明，迷迭香油的主要成分有桉油醇、α-蒎烯、月桂烯、对伞花烃、蒎烯、樟脑、莰烯、柠檬烯、冰片、马鞭酮、冰片乙酸酯等。研究发现，产地和季节的变化会影响植物挥发油成分的变化，最终影响植物挥发油的生物活性r . officinalisl .[39]。

该结果表明，除了在固定油中发现的其他酚类化合物可能是这些反应的原因。这种对胆固醇还原的影响可能归因于消化道中胆固醇胶束溶解的降低，以增加胆汁流动，胆汁胆固醇和胆汁酸浓度，并随后增加类固醇的粪便排泄的随后增加[40]。该保护可归因于甘氨酸酸，其据报道抑制诱导型一氧化氮合酶（InOS）的表达，并抑制了Raw 264.7巨噬细胞中的超氧化物和3-硝基荧光蛋白的产生[41]。

我们建议富含酚类成分的油具有对LDL氧化的最高抗氧化活性。Omer等人。报道，1,8-桉孔和α-突烯具有抗氧化剂，可以改变LDL颗粒对LDL受体的亲和力。此外，Ramesh等人。[43]表明，酚类化合物的膳食摄入可抑制LDL的氧化，从而降低心血管疾病的危险因素。黄酮类化合物是一类通过抑制反应性氧和氮物质形成和保护抗氧化防御系统来具有抗氧化性能的多酚化合物，此外黄酮可以通过使肝细胞更有效地去除LDL来作用。来自血液。为此，黄酮类化合物在肝脏中增加LDL受体密度，并通过与载脂蛋白B结合[44]。

观察到与阳性olorunnisola等人相比，通过油的效果降低了诸如AST，ALT，G-GT和ALP的酶。[45]据报道，共化化合物如黄酮类化合物的共同施用，防止肝功能损伤导致肝功能试验的状态改善。Saleh等人。据报道，转氨酶酶的血清水平的降低可能是由于各种酚类化合物和倍半酮化合物的存在，可能是肝损伤的保护作用的原因。在人类中，ROS的过度产生可能导致组织损伤，并涉及核酸和蛋白质的疾病进展和氧化损伤[47]。当缺乏抗氧化剂来抑制过量的反应性自由基，心血管，癌症，高脂血症，糖尿病，阿尔茨海默氏症和炎症性疾病可能在体内产生。药物产品通常补充合成抗氧化剂，如丁基化羟基甲苯（BHT）和四丁基羟基醌（TBHQ）。然而，植物产品的天然抗氧化剂在减少ROS水平方面可能更有效

合成抗氧化剂。此外，合成抗氧化剂的膳食摄入在高浓度[48]时可能引起遗传毒性和致癌性。迷迭香对肝脏损伤的保护机制可能与迷迭香成分作为自由基清除剂阻断自由基[49]有关。高脂血症小鼠血浆丙二醛含量显著降低，抗氧化酶水平显著升高，并有回归正常水平的趋势，显示了其强大的抗氧化作用。抗氧化剂的作用是破坏抗氧化链，阻止自由基反应的传播;这可以保护细胞免受氧化应激。维生素E尤其重要，它可以保护细胞免受脂质过氧化的伤害，在脂质过氧化过程中，自由基会攻击脂肪酸，造成膜的结构损伤，导致次级细胞毒性产物的形成，如MDA[50]。抗氧化剂被认为中和自由基脂链的贡献一个氢原子通常从一个酚羟基,这反过来将酚组转化为稳定的自由基,不启动或传播的进一步氧化脂质(51岁,52)报道,各种类黄酮(芦丁、dihydroquercetin槲皮素、表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯)，儿茶素抑制微粒体脂质过氧化作用最强。它们都能螯合铁²⁺、铁³⁺，CU2 +和有效o₂。清除剂在不同程度上。

我们的研究表明，该油对高脂血症动物模型的健康促进作用可能与高多酚含量以及增强机体总抗氧化防御系统有关。作为预防性抗氧化剂，可直接阻断自由基，延缓或减缓氧化过程，从而降低MDA水平。Bhosale et al.[53]报道，MDA水平较低，SOD活性较高可能与多酚和类黄酮有关。SOD催化超氧阴离子分解为过氧化氢，过氧化氢被CAT和GPx转化为水。营养抗氧化剂，包括在膳食抗氧化剂中，是破坏链的抗氧化剂，它与酶抗氧化剂一起工作，在生理极限[54]内调节活性氧。天然植物抗氧化剂包括酚类化合物可以清除自由基[55]。因此，酚类化合物可能有助于保护细胞免受自由基[56]引起的氧化损伤。研究表明，富含酚类化合物的植物提取物可降低MDA，提高SOD活性。[54]结果表明，迷迭香对高脂血症大鼠血脂有明显的抑制作用，对抗氧化酶活性有明显的增强作用。

综上所述，迷迭香酚类化合物具有抗高脂血症诱导的氧化应激作用，可提高抗氧化酶活性，降低硫代巴比妥酸活性物质的含量。固定的油脂提取物也能改善血脂，有助于减少心血管疾病。未来对迷迭香酚类化合物的生物利用度及其在氧化应激相关疾病中激活的信号通路的调节作用的分析，可能有助于阐明这些抗氧化化合物在胆固醇稳态和氧化应激参数中的作用。