目标:人类疹子病毒可造成威胁生命的疾病在免疫混杂儿童中产生,特别是白血病患者研究的目的是检测人体疹病毒(HHV1-7)并使用2项独立PCR解析研究其在中东小儿白血病患者的临床意义

方法论检测人类寄生虫病毒脱氧核糖核酸样本有200名小白血病病人,此外还有90名献血者使用多路PCR解析控制组检测出正结果时 即时PCR测试病毒负载

结果:中东儿科Leukei最常染色体为CMV, 后排HHV6VV7HHV7HSV1和HSV2, 分别为92/200(46%)、76/200(38%)、72/200(36%)、48/200(24%)、12/200(6%)、8/200(4%)和2/200(1%)。lekemic病人与其控制CMV、EBV、HHV6和VZV(P<0.05)之间在统计意义上有差合并感染百分比和临床参数关系已经研究完毕,绝对神经元计数增加,全白化计数增加,HHV6/CMV六至十一岁年龄组发烧和中微粒持续时间增加,12至18岁年龄组发烧时间增加,EBV/CMV和CMV/HHV6尤然同时,结果显示多式PCR检测接近单式PCR检测特征和敏感度,转而证明它有效早期诊断HERPES病毒感染

结论:复用PCR技术有助于筛检病毒感染它将节省时间、努力和成本效益,并会帮助快速诊断然而,病毒感染的临床关联性需要用量化实时PCR来评价,转而通过使用适当的抗病毒处理帮助病人管理

多功能多功能复数程序、实时复数程序、人类寄生虫病毒、临床意义、小儿白血病患者

目标:人类疹子病毒可造成威胁生命的疾病在免疫混杂儿童中产生,特别是白血病患者研究的目的是检测人体疹病毒(HHV1-7)并使用2项独立PCR解析研究其在中东小儿白血病患者的临床意义

方法论检测人类寄生虫病毒脱氧核糖核酸样本有200名小白血病病人,此外还有90名献血者使用多路PCR解析控制组检测出正结果时 即时PCR测试病毒负载

结果:中东儿科Leukei最常染色体为CMV, 后排HHV6VV7HHV7HSV1和HSV2, 分别为92/200(46%)、76/200(38%)、72/200(36%)、48/200(24%)、12/200(6%)、8/200(4%)和2/200(1%)。lekemic病人与其控制CMV、EBV、HHV6和VZV(P<0.05)之间在统计意义上有差合并感染百分比和临床参数关系已经研究完毕,绝对神经元计数增加,全白化计数增加,HHV6/CMV六至十一岁年龄组发烧和中微粒持续时间增加,12至18岁年龄组发烧时间增加,EBV/CMV和CMV/HHV6尤然同时,结果显示多式PCR检测接近单式PCR检测特征和敏感度,转而证明它有效早期诊断HERPES病毒感染

结论:复用PCR技术有助于筛检病毒感染它将节省时间、努力和成本效益,并会帮助快速诊断然而,病毒感染的临床关联性需要用量化实时PCR来评价,转而通过使用适当的抗病毒处理帮助病人管理

多功能多功能复数程序、实时复数程序、人类寄生虫病毒、临床意义、小儿白血病患者

人类疹子病毒可引起威胁生命疾病儿童,特别是白细胞病人和接受染色体干细胞移植者[1、2]因为这些病毒有相似的临床表现方式,但管理方式和预测方式不同,实验室诊断对识别这些寄生虫病毒至关重要,以确保最优病人管理并减少严重复杂症,因为这些病毒可用抗病毒药处理[2,3]。 人类寄生虫病毒2型(HSV-1)、HSV-2型(HSV-2)、HPS-BARV病毒2型(CMV)、Epstein-BAR病毒EBV型、Varicella-Zoser病毒6型(HHV-6型)和HHV-7型人类寄生虫病毒7型(HHV-7型)是儿童发病和死亡的主要原因常见识别方法如抗体检测和细胞文化中病毒隔离有很多限制需要其他诊断工具快速可靠检测病毒以克服这些限制正因如此,越来越需要准确和及时地诊断heps感染,以便有效使用这些强效抗病毒药物[4]聚合物链响应是检测或监测病毒基因组的有用工具传统病毒PCR检测单病毒并用血样快速检测7类病毒式脱氧核糖核酸基因组 [3-5]质多量实时PCR程序只需3小时完成使用这个检测系统,我们可以在早期阶段识别病毒,从而防止它向免疫分解病人公开和表示式病毒感染快速诊断帮助快速癌症患者管理在当前研究中,多式复数和实时复数解析用于分析小白血病者血液样本及其控件中的人类黄皮病毒家庭基因组脱氧核糖核酸(HHV1-7)。检测出正结果时 即时PCR测试病毒负载50多拷贝/图贝(5x103拷贝/ml)被观察时,值被视为显值

研究对象为200名沙特子细胞白血病者[160例急性淋巴细胞白血病和40例急性髓白血病2019年1月至2021年12月期间,这些白血病病人在沙特阿拉伯Al Quryyat总医院诊断所有实验都按照相关法律和机构指南并符合《赫尔辛基宣言》的道德标准进行。Qurayyat卫生局机构审查委员会批准了协议(Rig NO:H-13-S-071)。信息化书面同意表从注册学习的所有病人和个人获取入院标准指小儿全科或AML患者18岁前不曾治疗或抗病毒治疗所有病人都接受预处理评估,包括全历史和物理检查以及例行基线调查,诊断和显示时需要使用卫生组织健康恶性学标准按疾病类别排列

全血标本从每个病人和控件收集处理脱氧核糖核酸使用QIAamp病毒RNA提取包提取(Qiagen、Valencia、USA)。提取按制造商指令完成病毒式脱氧核糖核酸量用纳诺-Drop2000分光计测量,100ng脱氧核酸模板用于PCR解析脱氧核糖核酸提取贴冰并立即用于PCR并存储到-80oC多式PCR和实时PCR解析用于分析白血病样本中的人类寄生虫病毒家庭基因组脱氧核糖核酸检测出正结果时 即时PCR测试病毒负载50多拷贝/图贝(5x103拷贝/ml)被观察时,值被视为显值

人类寄生虫病毒脱氧核糖核酸使用2项独立的PCR解析方法测量:多式定性PCR和实时量化PCR技术

多式PCR设计定性测量7个人类寄生虫病毒的基因组脱氧核子,即HSV-1型HSV-2型VERPERS病毒2型HSVV7型HHVV7型HERPERSETLA病毒VVVVVVVVVVVVVV多式PCR执行前田中等描述[3](表1)。

50个验血样本由多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路多路

几组素数对每种病毒分别使用优化PCR条件,前文说明[3,6-10]

实时PCR仅对发现多维PCR呈阳性的人型ERPS病毒执行实时PCR使用Amplitaq黄金和实时PCR7300系统7HERPES病毒素数序列和探针见表2素数和PCR条件前几次报告[11,12]中已有描述

样本中病毒拷贝数值被认为意义重大,观察50多拷贝/图贝(5x103拷贝/ml)

数据分析使用IBMSPSS高级统计版22数值数据表示为中值和范围定性数据表示频率和百分比奇夸测试或Fisher精确测试用于检验定性变量之间的关系通常不分布量化数据,使用 Mann-Whitney测试(非参数测试)对二组作比较所有测试都是双尾测试p值 < 0.05被认为意义重大

当前研究针对200名小脑病病人,176名病人(88%)处于感应治疗阶段,12名病人处于维护治疗阶段,12名病人接受复发病抢救处理(表3)。

儿科列心病人划分为四大类^st组范围0-1y2^后端组范围2-5y3^华府类别范围从6-11y和4^线程组范围12-18y每一组患者数分别为18人、60人、68人和54人。共感染百分比和7类病毒临床参数之间的关联性已经研究过HHV6/CMV六至十一岁年龄组发烧和中微粒持续时间增加,12-18岁年龄组特别是EBV/CMV和CMV/HHV6持续时间增加(表4)。

多式PCR和实时PCR解析用于分析白血病样本中的人类寄生虫病毒家庭基因组脱氧核糖核酸检测出正结果时 即时PCR测试病毒负载观察50多拷贝/tube(5x103/ml)时,值被视为显值HHV6-DNA由72名病人多发PCR检测到,实时PCR发现所有72名病人都高发HHV6病毒HSV1-DNA由8名病人复用PCR检测出,实时PCR发现所有8名病人都高HSV1病毒载荷此外,HSV2-DNA检测到2名病人,所有这些病人都有高病毒载荷,如表6所示反之,CMV-DNA由复用PCR检测到92名病人,但92例中只有61例实时PCR呈阳性(66%)。76名病人多发PCR检测EBV-DNA,76例中54例(71%)实时PCR检测为正数VZV-DNA共48名病人通过复用PCR检测到,48例中36例(75%)实时PCR检测到正数HHV7-DNA由复用PCR检测出12名病人,12例中9例(75%)通过实时PCR检测为正数

7个HERPES病毒基因组在白血病组和正常控制组测试定性多路PCR解析中东儿科Leukei最常染色体为CMV, 后排HHV6VV7HHV7HSV1和HSV2, 分别为92/200(46%)、76/200(38%)、72/200(36%)、48/200(24%)、12/200(6%)、8/200(4%)和2/200(1%)。lekemic病人与其控制CMV、EBV、HHV6和VZV(P<0.05)之间在统计意义上存在差分(表5)。

反之,用紫外线检测多光谱分片显示,使用7类人类树形病毒专用素集时获取到预期尺寸放大片段(图1)。

关于多路技术的有效性,50个DNA阳性样本用常规PCR法对每种病毒使用单素集进行进一步分析检测结果显示多式PCR检测特征和敏感度接近单式PCR检测,转而证明它有效早期诊断HERPES病毒感染(表6)。

ERPES病毒感染是染色体恶性病人发病和死亡的重要原因大约50%15岁以下儿童患白血病或淋巴瘤,All最常用寄生虫病毒感染常见识别方法,如抗体检测和细胞文化中病毒隔离有许多限制需要其他诊断工具快速可靠检测病毒以克服这些限制因此,越来越需要准确和及时地诊断heps感染,以便有效使用这些强效抗病毒药物[4]

当前研究旨在执行多功能PCR技术并评价它7类病毒检测效果省时省力 高成本效益 帮助快速诊断质复用复用程序对筛检寄生虫病毒感染有用然而,病毒感染的临床关联性需要用量化实时PCR来评价

多式PCR应用检测子院癌症患者HSV-1-2VVCMVVEVEVHVHV6HHV7HHVV7发现200名病人中有8例(4%)HSV1感染,200名病人中有2例(1%)HSV2感染控制组中HSV1和HSV2分别检测到3/90(3.3%)和0/90(0)研究发现51名儿科癌症病人中只有2%HSV1/2阳性[17]而在HSV-1的另一项研究中检测到8例(25%),控件中则缺位(p=0.009)。HSV-2在任何情况下都没有检测或用定性PCR[18]控制

VaricellaZoster病毒感染2200个儿科病例(24%)呈阳性,而在统计学上意义重大的控件中只有3个案例(3.3%)呈阳性(p=0.03)。类似观察者表示肾移植接收者中VZV的发生率约为4-12%[19]与研究30例免疫折合病人所得结果不同,发现21例(70%)呈阳性[20]

关于EBV感染问题,从统计学上看,病人与控制器之间有显著差异(p=0.01),76/200(38%)案例和10/90(11%)控制组检测到这些差异类似发现由[21,22]发现反之,发现EBV-DNA3正数的37名肿瘤病儿童中3名正数(8.1%)[23]Cukuranovic等性移植接收者中乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型乙型六氯环己烷约1%-3%[19]

细胞病毒感染一直极普遍,第三世界国家高感染率发生,比西方世界高(高达100%)(50-80%)[22]CMV感染在儿童中非常常见,为什么验血显示60%至90%的成人曾一度受CMV感染检测到92/200例(46%)和22/90控件(24%)(p=0.04)。

发现类似观察者发现CMVDNA98/711(13.8%)全血样本和168/711血浆样本Hemtoiet细胞移植接收者[24]转录病毒全血压比血清高, 整体血液含有免费和细胞关联病毒, 血清只含无细胞病毒!Lisboa等219名全血病人中154名(70.3%)比219105名全血病人(52.1%)P<0.001等离子剖析Wada等人发现全血34/303CMV(11.2%)比等离子16/303高5.9%,[25,26]

HHV-6A和HHV-6B当前工作的重点是诊断,因为HHV-6B引起子宫病wesolaeum,HHHV-6A主要隔离在免疫复合主机中HHV-6A和HHV-6B都可能成为移植和艾滋病环境的致病者HHV-6现已确认为淋巴病毒T细胞淋巴病毒与CD4淋巴细胞高度相似性[27]检测结果显示,HHV6在72/200(36%)病人和19/90(21%)控件中呈正数的病例与控件之间有统计上的重大差值(p=0.048)。16/50例HHV6脱氧核糖核酸检测者(32%)证实了相似的观察结果,他们的健康志愿者无一显示HHV6感染相关观察得到[9,28]确认这些结果不同于那些检测到6个子科案例的骨髓样本中所有子科案例(9%),也不同于51个子科癌症病人中HHV6检测者(19.6%)[17]

HHV-7病毒人体感染12/200例呈阳性(6%),而1/90控件为1.1%(p=0.56)。郑等人先前对119个血液样本(74位献血者,45位中国疑似politrapicrocea感染者)的研究发现,HHV-6和HHV-7感染阳性病例为40%和73.3%,而控制组HHV-6和HHV-7感染阳性病例分别为16.2%和55%[29]苏吉塔等人先前曾对111个脉冲液样本做工作,用复元复数并实时PCR检测人类寄生虫病毒基因组(HHV1-8),他们宣布HHV7-HHV8-脱氧核糖核酸缺失[12]Wada等人早先对105脑流体样本和46Sera样本进行的其他研究使用多路实时PCR检测和量化HSV、HHV-6和HHV-7脱氧核糖核酸时发现HHV7DNA出现在2/105样本中(1.9%)CSF样本和0/46%Sera样本中[30]Handous等前一份报告发现HHV7感染4/95(4.2%)白血病病人,接近结果[31]

病毒诊断领域有相当大的发展,这是通过引进快速推进PCR方法实现的,该方法使得诊断具体病毒感染成为可能。病毒感染常引出相似的临床症状, 这对于快速和精确诊断并有效处理病毒感染非常重要开发复用PCR技术以同时检测并识别7类Expe病毒(HSV-1/2、VZV、EBV、CMV、HHV-6和HHV-7)的脱氧核糖核酸,这是我们研究的主要目标

共感染百分比和7类病毒临床参数之间的关联性已经研究过观察发现HHV6/CMV六至十一岁年龄组发烧和中微量计数增加,12-18岁年龄组发烧时间增加,EBV/CMV和CMV/HHV6尤然这可能归结为白血病免疫抑制,其处理可能诱发病人更高的复发风险这些结果与前次报告所实现的结果一致[9]Handous等人对非移植急性白血病接受化疗的病人同时感染人体寄生虫病毒(CMV、HHV-6、HHV-7和EBV)。发现CMV/HHV-6最常并发,这与我们的调查结果相似[31]

关于复用法的敏感度和特性,评价了50个脱氧核糖核酸样本对比单题解析结果,多路解析敏感度分别为80%、75%、83.3%、81.9%、90%、80%和80%HSV1、HSV2、VZV、EBV、CMV、HHV6和HHV7反之,多路检测特性分别为100%、100%、94.8%、92.9%、93.3%、95%和95%HSV1、HSV2、VZV、EBV、CMV、HHV6和HHV7基于结果 多克斯PCR解析接近单PCR解析特性和敏感度,转而证明它有效早期诊断寄生虫病毒因此,这使我们能够使用复用复用复用法检测并识别7类人类黄寄病毒,这些复用法便于快速使用适当的抗病毒处理法帮助病人管理并因多式PCR定性测量法,人体黄疹病毒,不论感染阶段(即甚至在隐形阶段),都可能在从健康个体获取的某些样本中检测到选择适当的采样源至关重要Wada等人报告了近似结果对比单题解析结果后发现多路解析敏感度和特性值分别为96.0和100%EBV,94.7%和95.7%CMV,89.2%和94.6%HHV-6另一位作者也得出类似结果[263]。

例常诊断中采用定性复用PCR技术有助于筛检病毒感染它将节省时间、努力和成本效益,并会帮助快速诊断数小时内7大病毒同时,应实时量化PCR评估7型HERPS病毒感染的临床关联性转而使用适当的抗病毒处理法帮助病人管理

据我们所知,这是在中东区域首项研究,使用复用复用复用复用复用解析法实时解析法分析沙特儿科白血病者血样样本中的人类寄生虫病毒家庭基因组脱氧核糖核酸并应用生物信息工具素设计并发百分数和临床参数之间的关联

这项研究是根据相关法律和机构指南并符合《赫尔辛基宣言》的道德标准进行的。Qurayyat卫生局机构审查委员会批准了协议(Rig NO:H-13-S-071)。信息化书面同意表从注册学习的所有病人和个人获取

不适用

数据集在当前研究中分析 相关作者应合理请求提供

作者声明他们没有竞技兴趣

当前研究由应用医学学院Jouf大学KSA资助

WS设计当前研究,受监督,对结果统计分析,编辑修改手稿HA监督临床部分并参与编辑研究的临床部分,HAA采集样本并实际执行部分ZF执行并监督实用部分SK实践部分IA修改编辑手稿MF评价结果并参与编辑研究的临床部分所有作者阅读并批准最终手稿

内医局和库赖亚特总医院临床实验室局的所有成员,卫生部KSA都表示感激,感谢他们在实际方面支持我们。